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检测细胞凋亡关键特征的七大法宝

时间：2023-08-01 16:13:51     来源：个人图书馆-优宁维

专门设计用于表达GFP的细胞系和表达蓝色或青色荧光蛋白的细胞。该试剂盒包括测定细胞凋亡早期和晚期以及坏死的所有必要试剂。试剂盒中的Cy3偶联物-能检测不同于荧光素或GFP的细胞凋亡。坏死检测试剂是一种红色的染料，有利于晚期细胞凋亡和坏死的检测。

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已经过验证和优化，可以定量测定细胞色素c在细胞膜和线粒体细胞组分中的含量，并提供细胞组分缓冲液。


【资料图】

是一种快速而简单的电泳方法，用于检测细胞凋亡。该方法通过荧光检测在嵌入低熔点琼脂糖的细胞中释放出来的DNA的完整性来测量DNA损伤。电泳时，凋亡细胞的DNA碎片会产生一个特有的“彗星（Comet）”形尾巴，因为小的DNA碎片在凝胶中的迁移速度比完整的基因组DNA更快。细胞DNA尾巴的长度与细胞凋亡的程度有关。

可通过检测Caspase-3和caspase-3类似物（细胞DEVDase）活性来确认细胞提取物中的凋亡情况，这是凋亡细胞中发现的主要caspase活性之一。Caspase-3是白介素-1转换酶（ICE）家族中的一个半胱氨酸蛋白酶的成员。在凋亡信号事件中，caspase-3被上游蛋白酶激活，包括caspase-6、caspase-8和细胞毒性T细胞衍生的颗粒酶B。Caspase-3裂解的目标物包括多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）、核蛋白、凝溶胶蛋白和其他。

利用生物发光法检测ATP水平，可同时快速筛查哺乳动物细胞的凋亡和增殖。该试剂盒利用荧光素酶催化ATP和荧光素而化学发光，同时可使用发光仪测量。

可有效检测细胞凋亡。喜树碱诱导Jurkat细胞凋亡并分析其ATP水平。时间曲线显示喜树碱诱导细胞凋亡后ATP水平的下降。ATP水平的下降与Annexin V阳性染色细胞的增加负相关。

可用于荧光显微镜、流式细胞仪和微孔板检测。细胞渗透性DNA染色染料在染色体缩合时发出更亮的荧光，将细胞核缩合的凋亡细胞与正常细胞区分开来。

使用阳离子染料测量线粒体膜电位，该染料可根据线粒体膜电位状态发出绿色或橙色荧光。在活细胞中，MITO-ID®膜电位染料以绿色荧光单体形式存在于细胞膜中，并以橙色荧光聚集体形式在线粒体中聚集。然而，在线粒体膜电位受损的细胞中，MITO-ID®膜电位染料主要以绿色荧光单体形式存在于整个细胞质中，在线粒体中不再显示橙色荧光。

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